英文說明書：
酪蛋白磷酸肽（CPP）：

Casein Phosphopeptide

Wako Pure Chemical Industries,Ltd.

CAS NO.: N/A

Grade: for Biochemistry

Regulation / Hazardous:

Storage condition: Keep at RT.

Manufacturer: Wako Pure ChemicalIndustries, Ltd.

Appearance:	White - slightlybrown, powder

This is a peptide obtained by degrading milk protein, or casein. Itis a kind of natural chelate compound and is drawing attention as asubstance accelerating passive absorption of calcium in the lowerpart of the small intestine. Its application to prevention ofanemia and osteoporosis is also being exploited. 


中文說明書：
酪蛋白磷酸肽（CaseinPhosphopeptides,CPP）是以牛奶酪蛋白為原料，經過單一或復合蛋白酶的水解，再對水解產物分離純化，進而噴霧干燥后得到的含有磷酸絲氨酸簇的天然生理活性肽。　　酪蛋白占牛乳總蛋白的80％，它是多種長度不同的短肽混合物，含有αs1、αs2、β和к-酪蛋白四種主要成分，其比例為34：8：33：9，**結構均已**測定。α和β酪蛋白含有高含量的磷酸絲氨酰殘基，其中αs酪蛋白氨基酸殘基數為199，含8個磷酸絲氨酰基，β-酪蛋白由209個氨基酸殘基構成，含5個磷酸絲氨酰基。　　CPP的核心部位由3個磷酸絲氨酸殘基組成一個-Ser（P）-殘基簇，后面緊接著2個-G1u-殘基組成的。CPP具有很強的促鈣以及其它礦物元素吸收的活性,這是由于CPP的核心部位可以與鈣以及鐵、鎂等二價和某些三價礦物離子結合，同時也可以阻止CPP的進一步水解（Kasai，1992）。　　Hiroshi等(1974)用動物實驗表明，酪蛋白可在動物腸道內形成CPPs并確定其結構為SerP-SerP-SerP-Glu-Ile-Pro-Asn。Nicholas等(1974)用胰蛋白酶水解酪蛋白，經過精制、純化得到CPPs，其核心結構為：-SerP-SerP-SerP-Glu-Glu-。　　CPPs結構中的磷酸絲氨酰殘基(-Ser(P)-)成簇存在，在腸道pH弱堿性環境下帶負電荷，可阻止消化酶的進一步作用，使CPPs不會被進一步水解而在腸中穩定存在。這些氨基酸的負電荷側鏈，尤其是磷酸基團是礦物質結合的位點。CPPs能與某些二價的礦物離子形成可溶性的有機磷酸鹽，可充當不同礦物質的載體，尤其是鈣。而CPPs的持鈣力大小與其結構有關，CPPs中氮與磷的摩爾比值（N/P）小，CPPs的肽鏈就短，磷酸基的密度大，則CPPs純度越高，促進鈣的吸收和利用的作用也就越強。　　CPP是一種具有生物活性的多磷酸基肽，由于它含有三個磷酸基，可以和金屬離子，特別是鈣離子結合形成可溶性復合物，這種復合物的形成一方面可以有效的避免鈣在小腸的中性或微堿性環境中形成沉淀，另一方面它可以在沒有維生素D參與地條件下被腸壁細胞吸收，目前也是*有效的促鈣吸收因子。實驗表明，一個分子的CPP能促進1.43個鈣的吸收。CPP不僅可以作為鈣的載體，也可以作為鐵、錳、鋅、硒的載體。因為CPP是從天然蛋白質中提取的多肽，具有**反應小、**可靠的優點。所以已被公認為應用面較廣泛的功能性食品添加劑，它能促進嬰幼兒與青少年的健康成長和提高對中老年人的保健作用。　　二、CPPs結構 　　CPPs分布于aSI、β-酪蛋白等牛乳酪蛋白的不同區域，其活性中心是連續的磷酸絲氨酰和谷氨酰簇，基本結構可表示為：-SerP—SerP—SerP—Glu—Glu—。經酶消化所產生的CPPs功能區結構主要有：αSI(43-58)2P、αSI（59-79）5P、αS2(46-70)4P、β(1-28)4P、β(33-48)IP。由此可見，CPPs實際上是一類含有磷酸絲氨酰和谷氨酰簇的短肽，其產品的分子量是不均一的：動物體內分離的cpp比體外水解產物短，但含有相同的基本核心結構。　　本產品是牛奶酪蛋白中CPP的活性中心是成串的磷酸絲氨酸和谷氨酸族，其基本結構可表示為-serp-serp-serp-glu-glu-.　　牛αs1‐酪蛋白：Gly45-Serp-Thr-Glu-Asp51-Glu63-Serp-Ile-Serp-Serp-Serp- 　　-Glu-Glu70-Asn74-Serp-Val-Glu-Gln78- 　　牛 αs2-酪蛋白：-Val17-Serp-Serp-Serp-Glu-Glu-Ser-Ile-Serp-Gln27- 　　-Gly55-Serp-Serp-Serp-Glu-Glu-Serp-Ala-Glu63- 　　-Glu142-Serp-Thr-Glul45- 　　牛β-酪蛋白：-Glu14-Serp-Lcu-Serp-Serp-Serp-Glu-Glu21- 　　-Glu34-Serp-Serp-Glu-Glu37- 　　人β酪蛋白：-Glu2-Thrp-Ile-Llu-Serp-Lcu-Serp-Serp-Serp-Glu-Glu12- 　　大鼠 α-酪蛋白：-Asp18-Serp-Serp-Serp-Glu-Asp23- 　　三、酪蛋白磷酸肽（CPP）的制備 　　1、方法一：牛奶→酪蛋白→酶水解→精制→脫苦味→干燥→CPP成品 　　2、方法2 　　目前工業制備CPP的方法主要有鈣—乙醇沉淀法、膜分離法和離子交換法3種（湯亞杰，1998），而生產過程可分為酪蛋白的水解和CPP的分離兩步。　　鈣—乙醇沉淀法工藝路線：酪蛋白→胰蛋白酶水解（Ph-stat法檢測水解度）→酪蛋白水解液→鈣—乙醇沉淀→分離→干燥→CPP產品。　　膜分離法生產CPP的工藝路線：酪蛋白→酪蛋白水解液→過濾→分離→噴霧干燥→CPP產品。 　　根據對酪蛋白水解后的產物所采取的不同處理方法，將分離分為4種，即不經過分離處理、鈣—乙醇沉淀后過濾、膜過濾和離子交換樹脂純化。然后進行噴霧干燥得到CPP產品。　　焦宇知等（2004）采用Alcalase水解酪蛋白并運用納濾技術生產CPP，與鈣—乙醇沉淀工藝進行比較的結果顯示：在*佳反應條件下，Alcalase對酪蛋白水解能力比胰蛋白酶強4%～8%，而且Alcalase比胰蛋白酶便宜；TNBS法替代Ph-stat法監測酪蛋白水解，提高了準確度，也可明顯降低CPP產品中的灰分含量。此方法生產的CPP在體外的功能試驗表明，CPP可阻止亞鐵離子的沉淀，鈣結合能力隨著樣品中氮與磷的摩爾比的降低而增大，磷酸基的密度是CPP樣品結合鈣能力的關鍵指標之一。　　王雋等（2004）研究結果表明復合酶比單酶水解度大，可以提高底物的利用率，水解速率增大。并且認為生產中采用單一酶水解時水解度低，酶消耗量大，底物浪費，CPP成本高。所以篩選合適的復合酶系、確定合適的酶促反應條件，以及分離方法的改進或結合是今后CPP生產的發展方向。　　3、方法三 　　以酪蛋白為原料，用蛋白酶水解，使酪蛋白磷酸肽游離，噴霧干燥成低純度產品，用離子交換樹脂脫除或用酶分解去除酪蛋白水解后呈現的苦味，再對酪蛋白水解物絡合分離，凝膠過濾或膜分離等方法進行純化則可得高純度CPPs。該法仍存在4個方面問題有待進一步完善。　　(1)篩選合適的酶，目前一般采用特異性的蛋白酶。研究表明，如果僅用單一酶，則存在水解度低，消耗大量的酶和底物而導致成本高的問題，所以有待研究出合適的復合酶體系以利CPPs制備的工業化。