英文说明书：
酪蛋白磷酸肽（CPP）：

Casein Phosphopeptide

Wako Pure Chemical Industries,Ltd.

CAS NO.: N/A

Grade: for Biochemistry

Regulation / Hazardous:

Storage condition: Keep at RT.

Manufacturer: Wako Pure ChemicalIndustries, Ltd.

Appearance:	White - slightlybrown, powder

This is a peptide obtained by degrading milk protein, or casein. Itis a kind of natural chelate compound and is drawing attention as asubstance accelerating passive absorption of calcium in the lowerpart of the small intestine. Its application to prevention ofanemia and osteoporosis is also being exploited. 


中文说明书：
酪蛋白磷酸肽（CaseinPhosphopeptides,CPP）是以牛奶酪蛋白为原料，经过单一或复合蛋白酶的水解，再对水解产物分离纯化，进而喷雾干燥后得到的含有磷酸丝氨酸簇的天然生理活性肽。　　酪蛋白占牛乳总蛋白的80％，它是多种长度不同的短肽混合物，含有αs1、αs2、β和к-酪蛋白四种主要成分，其比例为34：8：33：9，**结构均已**测定。α和β酪蛋白含有高含量的磷酸丝氨酰残基，其中αs酪蛋白氨基酸残基数为199，含8个磷酸丝氨酰基，β-酪蛋白由209个氨基酸残基构成，含5个磷酸丝氨酰基。　　CPP的核心部位由3个磷酸丝氨酸残基组成一个-Ser（P）-残基簇，后面紧接着2个-G1u-残基组成的。CPP具有很强的促钙以及其它矿物元素吸收的活性,这是由于CPP的核心部位可以与钙以及铁、镁等二价和某些三价矿物离子结合，同时也可以阻止CPP的进一步水解（Kasai，1992）。　　Hiroshi等(1974)用动物实验表明，酪蛋白可在动物肠道内形成CPPs并确定其结构为SerP-SerP-SerP-Glu-Ile-Pro-Asn。Nicholas等(1974)用胰蛋白酶水解酪蛋白，经过精制、纯化得到CPPs，其核心结构为：-SerP-SerP-SerP-Glu-Glu-。　　CPPs结构中的磷酸丝氨酰残基(-Ser(P)-)成簇存在，在肠道pH弱碱性环境下带负电荷，可阻止消化酶的进一步作用，使CPPs不会被进一步水解而在肠中稳定存在。这些氨基酸的负电荷侧链，尤其是磷酸基团是矿物质结合的位点。CPPs能与某些二价的矿物离子形成可溶性的有机磷酸盐，可充当不同矿物质的载体，尤其是钙。而CPPs的持钙力大小与其结构有关，CPPs中氮与磷的摩尔比值（N/P）小，CPPs的肽链就短，磷酸基的密度大，则CPPs纯度越高，促进钙的吸收和利用的作用也就越强。　　CPP是一种具有生物活性的多磷酸基肽，由于它含有三个磷酸基，可以和金属离子，特别是钙离子结合形成可溶性复合物，这种复合物的形成一方面可以有效的避免钙在小肠的中性或微碱性环境中形成沉淀，另一方面它可以在没有维生素D参与地条件下被肠壁细胞吸收，目前也是*有效的促钙吸收因子。实验表明，一个分子的CPP能促进1.43个钙的吸收。CPP不仅可以作为钙的载体，也可以作为铁、锰、锌、硒的载体。因为CPP是从天然蛋白质中提取的多肽，具有**反应小、**可靠的优点。所以已被公认为应用面较广泛的功能性食品添加剂，它能促进婴幼儿与青少年的健康成长和提高对中老年人的保健作用。　　二、CPPs结构 　　CPPs分布于aSI、β-酪蛋白等牛乳酪蛋白的不同区域，其活性中心是连续的磷酸丝氨酰和谷氨酰簇，基本结构可表示为：-SerP—SerP—SerP—Glu—Glu—。经酶消化所产生的CPPs功能区结构主要有：αSI(43-58)2P、αSI（59-79）5P、αS2(46-70)4P、β(1-28)4P、β(33-48)IP。由此可见，CPPs实际上是一类含有磷酸丝氨酰和谷氨酰簇的短肽，其产品的分子量是不均一的：动物体内分离的cpp比体外水解产物短，但含有相同的基本核心结构。　　本产品是牛奶酪蛋白中CPP的活性中心是成串的磷酸丝氨酸和谷氨酸族，其基本结构可表示为-serp-serp-serp-glu-glu-.　　牛αs1‐酪蛋白：Gly45-Serp-Thr-Glu-Asp51-Glu63-Serp-Ile-Serp-Serp-Serp- 　　-Glu-Glu70-Asn74-Serp-Val-Glu-Gln78- 　　牛 αs2-酪蛋白：-Val17-Serp-Serp-Serp-Glu-Glu-Ser-Ile-Serp-Gln27- 　　-Gly55-Serp-Serp-Serp-Glu-Glu-Serp-Ala-Glu63- 　　-Glu142-Serp-Thr-Glul45- 　　牛β-酪蛋白：-Glu14-Serp-Lcu-Serp-Serp-Serp-Glu-Glu21- 　　-Glu34-Serp-Serp-Glu-Glu37- 　　人β酪蛋白：-Glu2-Thrp-Ile-Llu-Serp-Lcu-Serp-Serp-Serp-Glu-Glu12- 　　大鼠 α-酪蛋白：-Asp18-Serp-Serp-Serp-Glu-Asp23- 　　三、酪蛋白磷酸肽（CPP）的制备 　　1、方法一：牛奶→酪蛋白→酶水解→精制→脱苦味→干燥→CPP成品 　　2、方法2 　　目前工业制备CPP的方法主要有钙—乙醇沉淀法、膜分离法和离子交换法3种（汤亚杰，1998），而生产过程可分为酪蛋白的水解和CPP的分离两步。　　钙—乙醇沉淀法工艺路线：酪蛋白→胰蛋白酶水解（Ph-stat法检测水解度）→酪蛋白水解液→钙—乙醇沉淀→分离→干燥→CPP产品。　　膜分离法生产CPP的工艺路线：酪蛋白→酪蛋白水解液→过滤→分离→喷雾干燥→CPP产品。 　　根据对酪蛋白水解后的产物所采取的不同处理方法，将分离分为4种，即不经过分离处理、钙—乙醇沉淀后过滤、膜过滤和离子交换树脂纯化。然后进行喷雾干燥得到CPP产品。　　焦宇知等（2004）采用Alcalase水解酪蛋白并运用纳滤技术生产CPP，与钙—乙醇沉淀工艺进行比较的结果显示：在*佳反应条件下，Alcalase对酪蛋白水解能力比胰蛋白酶强4%～8%，而且Alcalase比胰蛋白酶便宜；TNBS法替代Ph-stat法监测酪蛋白水解，提高了准确度，也可明显降低CPP产品中的灰分含量。此方法生产的CPP在体外的功能试验表明，CPP可阻止亚铁离子的沉淀，钙结合能力随着样品中氮与磷的摩尔比的降低而增大，磷酸基的密度是CPP样品结合钙能力的关键指标之一。　　王隽等（2004）研究结果表明复合酶比单酶水解度大，可以提高底物的利用率，水解速率增大。并且认为生产中采用单一酶水解时水解度低，酶消耗量大，底物浪费，CPP成本高。所以筛选合适的复合酶系、确定合适的酶促反应条件，以及分离方法的改进或结合是今后CPP生产的发展方向。　　3、方法三 　　以酪蛋白为原料，用蛋白酶水解，使酪蛋白磷酸肽游离，喷雾干燥成低纯度产品，用离子交换树脂脱除或用酶分解去除酪蛋白水解后呈现的苦味，再对酪蛋白水解物络合分离，凝胶过滤或膜分离等方法进行纯化则可得高纯度CPPs。该法仍存在4个方面问题有待进一步完善。　　(1)筛选合适的酶，目前一般采用特异性的蛋白酶。研究表明，如果仅用单一酶，则存在水解度低，消耗大量的酶和底物而导致成本高的问题，所以有待研究出合适的复合酶体系以利CPPs制备的工业化。