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國產試劑盒
Bradford 蛋白定量試劑盒
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產品名稱:
Bradford 蛋白定量試劑盒
產品型號:
Obb-301003
產品展商:
國產
產品價格:
0.00 元
會員價格:
0.00 元
產品文檔:
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簡單介紹
Bradford 蛋白定量試劑盒 :Bradford法(考馬斯亮藍法),是目前靈敏度*高的蛋白質測定法之一。當Bradford 染色液(考馬斯亮藍G250)和蛋白在酸性條件下結合時,溶液顏色由棕黑色轉為藍色,*大吸光值波長由456nm 轉至595nm,吸光值與蛋白質的含量在一定濃度范圍內有較好的線性關系,通過測定吸光值大小并對照標準蛋白的吸光值,推算出蛋白濃度,實現了蛋白濃度測定的快速,穩定和高
Bradford 蛋白定量試劑盒
的詳細介紹
Bradford 蛋白定量試劑盒
產品簡介:
Bradford法(考馬斯亮藍法),是目前靈敏度*高的蛋白質測定法之一。當Bradford 染色液(考馬斯亮藍G250)和蛋白在酸性條件下結合時,溶液顏色由棕黑色轉為藍色,*大吸光值波長由456nm 轉至595nm,吸光值與蛋白質的含量在一定濃度范圍內有較好的線性關系,通過測定吸光值大小并對照標準蛋白的吸光值,推算出蛋白濃度,實現了蛋白濃度測定的快速,穩定和高靈敏度。
Bradford染色液為2倍濃縮母液,便于儲存。
產品組成:
產品組成
301003
301004
規格
250 assays
1000 assays
蛋白標準(1mg/ml)
0.5ml
2ml
Bradford 2x染色液
25ml
100ml
使用方法:
A. 96孔酶標板測定:
1. 標準曲線繪制。取一塊酶標板,按以下表格數據加入試劑:
孔號
0
1
2
3
4
5
6
蛋白標準(ml)
0
1
2
4
6
8
10
去離子水(ml)
100
99
98
96
94
92
90
Bradford 2x染色液(ml)
100
100
100
100
100
100
100
對應的蛋白含量(mg)
0
1
2
4
6
8
10
2. 振蕩混勻后,室溫放置5-10分鐘。
3. 用酶標儀測定A595,以不含BSA的光吸收值為空白對照。
4. 以蛋白含量(mg)為橫坐標,吸光值為縱坐標,繪出標準曲線。
5. 樣品測定:將待測蛋白樣品用去離子水稀釋至適當濃度,取10ml樣品,加入100ml 2x Bradford染色液和90ml的去離子水,混勻后放置5-10分鐘,然后以0號孔為對照,測定樣品吸收值A595。
6. 根據測得的吸收值,在標準曲線上即可查得樣品的蛋白含量。
7. 計算蛋白濃度:以查得的蛋白含量除以樣品體積10ml,再乘以相應的稀釋倍數即可得到待測樣品的實際濃度。
B. 比色皿測定
按照比色皿規格,與以上方法相同,適當按比例增加各溶液體積即可。
注意事項:
1. Bradford法對于去污劑敏感的,受高濃度去垢劑影響。需確保SDS低于0.1%,Triton X-100低于0.1%,Tween 20,60, 80低于0.06%。含去垢劑的樣品推薦使用BCA蛋白濃度測定試劑盒。
2.
染色液
使用前請
混勻
。
3. 將G250染色液放置到室溫再使用,有利于提高檢測的靈敏度。
4. 由于Bradford 法在蛋白濃度增高到一定時候,顏色反應并不成比例增加,因此得到的標準曲線只是在一定范圍內可以近似看成直線,每次應按照實際測得的標準曲線計算出相對**的蛋白濃度。
5. 反應在5分鐘后顯色充分,但在10分鐘后可能開始出現沉淀,故建議在加入染色液后5-10分鐘內完成檢測,誤差較小。
6. *好使用塑料比色皿,如使用玻璃比色皿或石英比色皿,使用后立即用少量95%的乙醇清洗。
儲存條件:
染色液2-8℃保存。蛋白標準-20°C保存。
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