山梨醇麥康凱瓊脂是FDA、DIN和SN標準推薦,用于食品、水和乳制品中大腸桿菌O157的檢測。蛋白胨和月示胨提供**生長發育所需的氮源、維生素和氨基酸,牛膽鹽和結晶紫抑制革蘭氏陽性菌的生長,氯化鈉維持滲透壓,瓊脂是凝固劑,中性紅是一種PH值指示劑,亞碲酸鉀和噻孢霉素抑制大部分革蘭氏陰性菌的生長,山梨醇提供碳源,0157菌不發酵或遲發酵山梨醇,形成具有棕色中心的無色菌落,其它大腸桿菌顯紅色。
注意 此培養基僅供實驗室使用。 用法 稱取本品 50g 加入1000ml蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌,煮沸1分鐘,121℃高壓**15分鐘,冷至45-50℃傾入無菌平皿。或冷至45-50℃加入混合添加劑(亞碲酸鉀2.5mg,頭孢克肟0.05mg),混勻,傾入無菌平皿。 貯存 制備好的平板保存于2-8℃,應避免光線直接照射,僅能保存7天。干燥培養基應放置于陰暗干燥處, 保存溫度2-30℃ 失效 干燥培養基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。 操作步驟 使用前,把制備好的平板放置室溫10-20分鐘。 1、按不同的標準和方法制備樣品 2、把樣品液涂布于平板上 3、36±1℃培養18-24h,選取5-8個無色透明菌落,接種到含0.01%MUG的LST肉湯中;若加入亞碲酸鉀和頭孢克肟,則選取5-8個有淡褐色中心的透明菌落,接種到含0.01%MUG的LST肉湯中。
質量控制 1、外觀 此干燥培養基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈淡紅色。制備好的平板呈透明桔紅色。 2、微生物試驗 在36±1℃培養18-24小時:
ATCC
生長情況
菌落顏色
不含混合添加劑
含混合添加劑
大腸桿菌O157
+++
無色透明
淡褐色中心無色透明菌落
金黃色葡萄球菌
25923
-/-
-
大腸桿菌
25922
紅色
沙門氏菌
方法的局限性 本培養基僅為大腸桿菌O157鑒定的一部份,需做其它補充試驗。 典型特征