山梨醇麦康凯琼脂是FDA、DIN和SN标准推荐,用于食品、水和乳制品中大肠杆菌O157的检测。蛋白胨和月示胨提供**生长发育所需的氮源、维生素和氨基酸,牛胆盐和结晶紫抑制革兰氏阳性菌的生长,氯化钠维持渗透压,琼脂是凝固剂,中性红是一种PH值指示剂,亚碲酸钾和噻孢霉素抑制大部分革兰氏阴性菌的生长,山梨醇提供碳源,0157菌不发酵或迟发酵山梨醇,形成具有棕色中心的无色菌落,其它大肠杆菌显红色。
注意 此培养基仅供实验室使用。 用法 称取本品 50g 加入1000ml蒸馏水,加热溶解并不停搅拌,煮沸1分钟,121℃高压**15分钟,冷至45-50℃倾入无菌平皿。或冷至45-50℃加入混合添加剂(亚碲酸钾2.5mg,头孢克肟0.05mg),混匀,倾入无菌平皿。 贮存 制备好的平板保存于2-8℃,应避免光线直接照射,仅能保存7天。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度2-30℃ 失效 干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。 操作步骤 使用前,把制备好的平板放置室温10-20分钟。 1、按不同的标准和方法制备样品 2、把样品液涂布于平板上 3、36±1℃培养18-24h,选取5-8个无色透明菌落,接种到含0.01%MUG的LST肉汤中;若加入亚碲酸钾和头孢克肟,则选取5-8个有淡褐色中心的透明菌落,接种到含0.01%MUG的LST肉汤中。
质量控制 1、外观 此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈淡红色。制备好的平板呈透明桔红色。 2、微生物试验 在36±1℃培养18-24小时:
ATCC
生长情况
菌落颜色
不含混合添加剂
含混合添加剂
大肠杆菌O157
+++
无色透明
淡褐色中心无色透明菌落
金黄色葡萄球菌
25923
-/-
-
大肠杆菌
25922
红色
沙门氏菌
方法的局限性 本培养基仅为大肠杆菌O157鉴定的一部份,需做其它补充试验。 典型特征