抗**药敏纸片的使用说明

1.        抗**药敏纸片分类和名称

注：纸片直径9.2 mm，30片/支，2-8℃保存，效期见包装。

2.        接种液的配制和接种

接种液的配制中，菌液浓度的控制是重要的，过浓会导致吡咯类抑菌圈判定困难出现假阴性。

对于大多数菌株，菌液浓度调成0.5麦氏浊度即可；克柔***应再稀释5倍；隐球菌属调成1.0麦氏浊度。

用无菌棉拭子沾取菌悬液，略挤压，直接均匀涂布平板，*后沿平皿周边绕两圈，保证涂布均匀。然后，平皿放35℃开盖倒扣干燥15分钟，须待平板上的水分被琼脂完全吸收后再贴纸片。纸片贴上后用镊尖压一下，使其贴平。建议9cm平皿一般贴直径9.2cm的药敏纸片4-5个。

3.        培养

在多数情况下，30-35℃培养18-24小时后马上测量抑菌圈，时间过长会使抑菌圈变小而导致假耐药。如果生长不好，抑菌圈不清(如：新型隐球菌)可适当延长培养时间至抑菌圈清晰为止。

4.        判读标准

注：

l  对于多烯类抗**药(AMB和NYS)，测量生长清晰的抑菌圈，抑菌圈内出现的菌落必须视为耐药突变株。

l  对于吡咯类抗**药(FLU、ITC、MIC、ECO、KET、CLO)，在抑菌圈内可能会出现较小的部分被抑制的菌落。测量时以正常生长的菌落形成的抑菌圈为准，其内部的较小菌落不应视为突变株。

l  对于5-氟胞嘧啶(FC)，测量生长清晰的抑菌圈，抑菌圈内出现的菌落通常为耐药突变株。

l  抗**药敏平板必须使用NCCLS推荐的RPMI-1640平板。使用其它平板可能会使FC无抑菌圈或抑菌圈减小。其它抗**药敏的抑菌圈也有不同程度的改变。