技术文章

**生化微量鉴定管及试纸试验结果判定说明

**生化微量鉴定管及试纸试验结果判定说明

名  称

结果判定

培养时间(小时)

注释

阳性

阴性

各类糖(醇、苷)类

黄色

紫色或不变色

18-24

根据指示剂不同,如颜色不边为阴性。

非发酵**糖类

黄色

紫色

24-48

供非发酵**鉴定用。

葡萄糖氧化-酵(OF)
葡萄球菌OF

黄色
黄色

 

紫色
紫色

 

24-48
24-48

同时接种两支生化管,一支加入**石蜡,覆盖液面,如两支均变黄色,为发酵型(F);加石蜡管不变色,另一支变黄色,为氧化型(O);如两支均不变色,为对糖不利用(NR0-)

β-半乳糖苷(ONPG)

深黄色

无色

4-18

接种菌量要大,产生黄色深浅有不同,黄色加深即为阳性。

七叶苷

棕黑色

不变色

18-24

链球菌如阴性反应,需继续观察至第3天。

胆汁七叶苷

棕黑色

不变色

18-24

链球菌如阴性反应,需继续观察至第3天。

美蓝牛乳

白色

蓝色

18-24

适用于肠球菌属、链球菌属的鉴定。

蛋白胨水(靛基质用)

红色

不变色

24-48

加靛基质试剂1滴,接触处出现红色为阳性,不变色为阴性。含水1%Nacl作弧菌科**鉴定用,使用方法相同。

葡萄糖磷酸盐胨水
(MR、VP用)

红色

不变色

24-48

加MR试剂1滴,即可观察结果。加VP甲液2滴、VP乙液1滴放35℃孵箱孵育2小时后观察。含1%Nacl作弧菌科**鉴定用,使用方法相同。

西蒙氏枸橼酸盐

蓝色

绿色

24-48

含1%Nacl作弧菌科**鉴定用,使用方法相同。

尿素

红色

黄色

8-24

使用于尿素分解的**。

硫化氢

黑色

不变色

18-24

硫酸亚铁法。

乙酰胺

红色

黄色

24-48

如阴性,应继续培养至颜色不加深,才可确认。

硝酸盐胨水
(霍乱红用)

红色

不变色

6-24

加浓硫酸1滴。

苯丙氨酸脱氨酶

蓝绿色

不变色

18-24

加10%Fecl31滴,在表层产生蓝绿色为阳性。

氧化酶试纸

红→
紫黑色

不变色

10秒

用**牙签刮取菌苔于氧化酶湿纸片上。

氧化酶试剂

红→
紫黑色

不变色

10-30秒

将试剂滴于18-24小时培养的菌落上,观察颜色变化,本试剂配好后储冰冻室内可保存2周。

鸟氨酸脱羧酶

紫色

黄色或不变色

18-24

需同时接种对照管一支,并在每管液面上封盖石蜡,入对照管变黄色,试验管变紫色,为阳性;如均变黄色或不变色,为阴性;均变紫色,需延长观察时间,如仍不变色,实验无意义。

赖氨酸脱羧酶

紫色

黄色或不变色

18-24

精氨酸脱羧酶

紫色

黄色或不变色

18-24

精氨双水解酶

红色

不变色

24-48

使用方法同上,作非发酵菌鉴定用,不加石蜡封闭。同时接种对照管一支。

非发酵菌用

鸟氨酸脱羧酶

紫色

黄色或不变

24-48

使用方法同上,液面上不加石蜡。含Nacl的各类氨基酸使用方法同上,液面需加石蜡,作弧菌科**鉴定用。

赖氨酸脱羧酶

紫色

黄色或不变

24-48

精氨酸脱羧酶

紫色

黄色或不变

24-48

名称

结果判定

培养时间(小时)

注释

阳性

阴性

明胶

液化

凝固

18-24

按规定时间培养后,放置4℃冰箱5-10分钟后观察,流动为阳性,凝固为阴性。

脱氧核糖核酸(DNA)

无色

亮绿色

24

适用于肠杆菌科、弧菌科,其他菌科建议使用DNA琼脂法。

丙二酸盐

蓝色

绿色

24-48

 

葡萄糖酸盐

橙红色

不变色

24-48

加班氏试剂1滴,于水浴煮沸10分钟观察结果

粘液酸

黄色

绿色

24-48

每隔12小时观察一次。

酒石酸盐

黄色

蓝绿色

18-24

同上

葡萄糖胺

黄色

绿色

24

 

醋酸盐

蓝色

绿色

24-48

每隔12小时观察一次。

硝酸盐还原

红色

不变色

18-24

加硝酸盐还原试剂甲、乙液各1滴,变红色为阳性。

不变色

红色

如不变色,再加锌粉少许后如呈红色,证实硝酸盐未被还原,判断为阴性,反之为阳性。

硝酸盐产气

倒管有
气泡

倒管无气泡

24

 

亚硝酸盐产气

倒管有
气泡

倒管无气泡

24

 

马尿酸钠

出现恒定沉淀物

无变化或沉淀物溶

48

需补足培养时失去的水分。离心后于上清液加Fecl3试剂1滴,10-15分钟观察结果,如沉淀物消失上层液面变澄清为阴性,反之为阳性。

***

浑浊生长

透明
不生长

24-72

注意接种菌量要适中,同时作空白对照。本产品易失效,需4℃冰箱保存。

血清糖类

黄色

不变色

18-24

作肺炎链球菌鉴定用。

血清糖类

黄色

不变色

18-24

作奈瑟氏菌属**鉴定用。

半固体(动力)

扩散生长

无扩散生长

8-24

非发酵菌动力在8小时内观察,其余**一般在18-24小时后观察。

40%胆汁

混浊生长

无变化

18-24

作D-型链球菌鉴定用。

PH9.6肉汤

混浊生长

无变化

18-24

同上。

6.5%高盐肉汤

混浊生长

无变化

18-24

同上。

0%~11%Nacl胨水

混浊生长

无变化

18-24

作弧菌科**嗜盐性试验鉴定用。

以上生化反应对某些**如反应缓和可疑,需延长观察时间同时重新接种一支。