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非变性蛋白裂解抽提液
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产品名称:
非变性蛋白裂解抽提液
产品货号:
Obb-310014
产品展商:
佰易聚生物商城
产品规格:100ml
产品品牌:国产
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产品价格:
180.00 元
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会员价格:
144.00 元
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产品文档:
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简单介绍
非变性蛋白裂解抽提液：非变性蛋白裂解液是一种在非变性条件下裂解细胞和组织的裂解液。能裂解细胞并在非变性条件下释放胞浆蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。非变性条件下的裂解蛋白产物最大限度地保留了蛋白的特性和功能。本裂解液裂解的细胞和组织样本，可以用于PAGE，Western，免疫沉淀和免疫共沉淀等。
非变性蛋白裂解抽提液
的详细介绍
非变性蛋白裂解抽提液
产品简介：
非变性蛋白裂解液是一种在非变性条件下裂解细胞和组织的裂解液。能裂解细胞并在非变性条件下释放胞浆蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。非变性条件下的裂解蛋白产物最大限度地保留了蛋白的特性和功能。本裂解液裂解的细胞和组织样本，可以用于PAGE，Western，免疫沉淀和免疫共沉淀等。
产品组成：
产品组成 | 310013 | 310014 |
非变性裂解液 | 50 ml | 100 ml |
蛋白酶抑制剂混合物 | 100ul | 200ul |
使用方法：
A． 细胞裂解
1. 裂解液制备：每1ml冷的非变性裂解液中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2. 取5-10×106个细胞，在4℃，1000rpm条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
3. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
4. 每5×106个细胞中加入500ul冷的裂解液（每106个细胞加100ul 非变性裂解液。大约相当于6孔板的每孔加入100ul~150ul，或一个75 cm2培养瓶加1~2 ml。裂解液和细胞应充分接触。如果非变性裂解液不足量，细胞裂解效率将会降低），混匀后，在4℃条件下振荡15-20分钟。
5. 在4℃，14000rpm条件下离心15分钟。
6. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。
B． 组织裂解
1. 裂解液制备：每1ml冷的非变性裂解液加入2ul蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2. 取100mg组织样本剪碎，加入1ml裂解液，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
3. 将组织匀浆吸入另一预冷的干净离心管中，在4℃，10000rpm条件下离心5分钟。
4. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。
上述蛋白提取物可分装后于-80℃冰箱保存备用。
注意事项：
1. 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。
2. 整个过程须保持样品处于低温状态。
储存条件：
-20℃保存。
有效期：
一年。