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核蛋白提取试剂盒

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产品名称: 核蛋白提取试剂盒

产品型号: Obb-310002

产品展商: 国产

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简单介绍

核蛋白提取试剂盒：适用于从细胞和动物组织制备核蛋白和胞浆蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。制备的核蛋白和胞浆蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、**共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。

核蛋白提取试剂盒 的详细介绍

核蛋白提取试剂盒

产品简介：

本试剂盒提供全套试剂，适用于从细胞和动物组织制备核蛋白和胞浆蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。制备的核蛋白和胞浆蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、**共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。

产品组成：

产品组成	310001	310002
规格	50 assays	100 assays
试剂 A (Cytoplasmic Extraction Reagent)	10ml	20ml
试剂 B (Nuclear Extraction Reagent)	10ml	20ml
蛋白酶抑制剂混合物	250ul	500ul

使用方法：

A．细胞蛋白提取

1. 取5-10×10⁶个细胞，在4℃，500×g条件下离心2-3分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。

2. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。

3. 每20ul细胞压积中加入200μl冷的Buffer A，2ul蛋白酶抑制剂混合物，高速涡旋振荡15秒，置冰上10分钟。

4. 再次高速涡旋振荡5秒，然后在4℃，16000×g条件下离心5分钟。

5. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到胞浆蛋白，请置于冰上或-80℃冰箱保存备用。

6. 在沉淀中加入200μl冷的Buffer B，2ul蛋白酶抑制剂混合物，高速涡旋振荡15秒。

7. 置冰上40分钟，每隔10分钟高速涡旋振荡15秒。

8. 在4℃，16000×g条件下离心10分钟。

9. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。

B．组织蛋白提取

1. 取适量组织样本剪碎，加冷PBS，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体（或用液氮研磨），冰上静置5分钟，小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。

2. 在4℃，500×g条件下离心2-3分钟，弃上清。

3. 按照细胞蛋白的提取方法的第3步骤往下操作即可。

上述蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用。

注意事项：

1. 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。

2. 整个过程须保持样品处于低温状态。

储存条件：

-20℃保存。

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