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非变性蛋白裂解抽提液

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产品名称: 非变性蛋白裂解抽提液

产品型号: Obb-310013

产品展商: 国产

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简单介绍

非变性蛋白裂解抽提液：非变性蛋白裂解液是一种在非变性条件下裂解细胞和组织的裂解液。能裂解细胞并在非变性条件下释放胞浆蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。非变性条件下的裂解蛋白产物*大限度地保留了蛋白的特性和功能。本裂解液裂解的细胞和组织样本，可以用于PAGE，Western，沉淀和共沉淀等。

非变性蛋白裂解抽提液 的详细介绍

非变性蛋白裂解抽提液
非变性蛋白裂解液是一种在非变性条件下裂解细胞和组织的裂解液。能裂解细胞并在非变性条件下释放胞浆蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。非变性条件下的裂解蛋白产物*大限度地保留了蛋白的特性和功能。本裂解液裂解的细胞和组织样本，可以用于PAGE，Western，**沉淀和**共沉淀等。

产品组成：

使用方法：

A．细胞裂解

1. 裂解液制备：每1ml冷的非变性裂解液中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。

2. 取5-10×10⁶个细胞，在4℃，1000rpm条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。

3. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。

4. 每5×10⁶个细胞中加入500ul冷的裂解液（每10⁶个细胞加100ul 非变性裂解液。大约相当于6孔板的每孔加入100ul~150ul，或一个75 cm²培养瓶加1~2 ml。裂解液和细胞应充分接触。如果非变性裂解液不足量，细胞裂解效率将会降低），混匀后，在4℃条件下振荡15-20分钟。

5. 在4℃，14000rpm条件下离心15分钟。

6. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。

B．组织裂解

1. 裂解液制备：每1ml冷的非变性裂解液加入2ul蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。

2. 取100mg组织样本剪碎，加入1ml裂解液，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。

3. 将组织匀浆吸入另一预冷的干净离心管中，在4℃，10000rpm条件下离心5分钟。

4. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。

上述蛋白提取物可分装后于-80℃冰箱保存备用。

注意事项：

1. 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。

2. 整个过程须保持样品处于低温状态。

储存条件：

-20℃保存。

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