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RIPA裂解液

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产品名称: RIPA裂解液
产品型号: Obb-310012
产品展商: 国产
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简单介绍

RIPA裂解液:RIPA裂解液对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用,是经典常用的细胞组织快速裂解液。使用RIPA 裂解液制备用于**共沉淀的裂解产物已经是一种优选的标准操作。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。


RIPA裂解液  的详细介绍
RIPA裂解液
产品简介:
RIPA裂解液对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用,是经典常用的细胞组织快速裂解液。使用RIPA 裂解液制备用于**共沉淀的裂解产物已经是一种优选的标准操作。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。
 
产品组成:
产品组成
310011
310012
RIPA 裂解液
50 ml
100 ml
蛋白酶抑制剂混合物
100ul
200ul
 
使用方法:
A. 细胞裂解
1.       裂解液制备:每1ml冷的RIPA裂解液中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
2.       取5-10×106个细胞,在4℃,1000rpm条件下离心5-10分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。
3.       用冷PBS洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
4.       每5×106个细胞中加入500ul冷的裂解液(每106个细胞加100ul RIPA裂解液。大约相当于6孔板的每孔加入100ul~150ul,或一个75 cm2培养瓶加1~2 ml。裂解液和细胞应充分接触。如果RIPA裂解液不足量,细胞裂解效率将会降低),混匀后,在4℃条件下振荡15-20分钟。
5.       在4℃,14000rpm条件下离心15分钟。
6.       快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,用于下游实验。
 
B. 组织裂解
1.       裂解液制备:每1ml冷的RIPA裂解液加入2ul蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
2.       取100mg组织样本剪碎,加入1ml裂解液,用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
3.       将组织匀浆吸入另一预冷的干净离心管中,在4℃,10000rpm条件下离心5分钟。
4.       将上清吸入另一预冷的干净离心管,用于下游实验。
 
上述蛋白提取物可分装后于-80℃冰箱保存备用。
 
 
 
注意事项:
1.     实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。
2.     整个过程须保持样品处于低温状态。
 
储存条件:
-20℃保存。
 

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