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Bradford 蛋白定量试剂盒

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产品名称: Bradford 蛋白定量试剂盒
产品型号: Obb-301004
产品展商: 国产
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简单介绍

Bradford 蛋白定量试剂盒：Bradford法（考马斯亮蓝法），是目前灵敏度*高的蛋白质测定法之一。当Bradford 染色液（考马斯亮蓝G250）和蛋白在酸性条件下结合时，溶液颜色由棕黑色转为蓝色，*大吸光值波长由456nm 转至595nm，吸光值与蛋白质的含量在一定浓度范围内有较好的线性关系，通过测定吸光值大小并对照标准蛋白的吸光值，推算出蛋白浓度，实现了蛋白浓度测定的快速，稳定和高灵


Bradford 蛋白定量试剂盒  的详细介绍
Bradford  蛋白定量试剂盒
产品简介：
Bradford法（考马斯亮蓝法），是目前灵敏度*高的蛋白质测定法之一。当Bradford 染色液（考马斯亮蓝G250）和蛋白在酸性条件下结合时，溶液颜色由棕黑色转为蓝色，*大吸光值波长由456nm 转至595nm，吸光值与蛋白质的含量在一定浓度范围内有较好的线性关系，通过测定吸光值大小并对照标准蛋白的吸光值，推算出蛋白浓度，实现了蛋白浓度测定的快速，稳定和高灵敏度。
   Bradford染色液为2倍浓缩母液，便于储存。
 
产品组成：

产品组成
301003
301004
规格
250 assays
1000 assays
蛋白标准(1mg/ml)
0.5ml
         2ml
Bradford 2x染色液
25ml
100ml

 
使用方法：
A． 96孔酶标板测定：
1.       标准曲线绘制。取一块酶标板，按以下表格数据加入试剂：

孔号
0
1
2
3
4
5
6
蛋白标准（ml）
0
1
2
4
6
8
10
去离子水（ml）
100
99
98
96
94
92
90
Bradford 2x染色液（ml）
100
100
100
100
100
100
100
对应的蛋白含量（mg）
0
1
2
4
6
8
10

 
2.       振荡混匀后，室温放置5-10分钟。
3.       用酶标仪测定A595，以不含BSA的光吸收值为空白对照。
4.     以蛋白含量（mg）为横坐标，吸光值为纵坐标，绘出标准曲线。
5.       样品测定：将待测蛋白样品用去离子水稀释至适当浓度，取10ml样品，加入100ml 2x Bradford染色液和90ml的去离子水，混匀后放置5-10分钟，然后以0号孔为对照，测定样品吸收值A595。
6.       根据测得的吸收值，在标准曲线上即可查得样品的蛋白含量。
7.       计算蛋白浓度：以查得的蛋白含量除以样品体积10ml，再乘以相应的稀释倍数即可得到待测样品的实际浓度。
 
B． 比色皿测定
        按照比色皿规格，与以上方法相同，适当按比例增加各溶液体积即可。
 
注意事项：
1.     Bradford法对于去污剂敏感的，受高浓度去垢剂影响。需确保SDS低于0.1%，Triton X-100低于0.1%，Tween 20,60, 80低于0.06%。含去垢剂的样品推荐使用BCA蛋白浓度测定试剂盒。
2.     染色液使用前请混匀。
3.     将G250染色液放置到室温再使用，有利于提高检测的灵敏度。
4.     由于Bradford 法在蛋白浓度增高到一定时候，颜色反应并不成比例增加，因此得到的标准曲线只是在一定范围内可以近似看成直线，每次应按照实际测得的标准曲线计算出相对**的蛋白浓度。
5.      反应在5分钟后显色充分，但在10分钟后可能开始出现沉淀，故建议在加入染色液后5-10分钟内完成检测，误差较小。
6.     *好使用塑料比色皿，如使用玻璃比色皿或石英比色皿，使用后立即用少量95%的乙醇清洗。
 
储存条件：
染色液2-8℃保存。蛋白标准-20°C保存。
 

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