pGEM® -T載體多克隆區T突出端的兩側均有BstZI酶切位點，使 用BstZI單酶消化即可釋放插入片段。也可選用適當的雙酶消化釋放 插入片段。pGEM® -T載體系統II除了pGEM® -T載體系統I所有成分外， 還包括JM109感受態細胞。
特點 • 快速連接: 使用2X快速連接緩沖液（2X Rapid Ligation Buffe） 可以使連接反應在室溫下1小時內完成。 • 藍/白篩選: pGEM® -T載體包含有T7和SP6 RNA聚合酶啟動 子，分別位于β半乳糖苷酶的α肽編碼區內多克隆位點的兩側。 α肽的插入失活允許在指示培養基上用顏色直接篩選重組克隆。 • f1復制起始位點: 可用于制備單鏈DNA。