產品資料

非變性蛋白裂解抽提液

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產品名稱: 非變性蛋白裂解抽提液
產品型號: Obb-310013
產品展商: 國產
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簡單介紹

非變性蛋白裂解抽提液：非變性蛋白裂解液是一種在非變性條件下裂解細胞和組織的裂解液。能裂解細胞并在非變性條件下釋放胞漿蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。非變性條件下的裂解蛋白產物*大限度地保留了蛋白的特性和功能。本裂解液裂解的細胞和組織樣本，可以用于PAGE，Western，**沉淀和**共沉淀等。


非變性蛋白裂解抽提液  的詳細介紹
非變性蛋白裂解抽提液
非變性蛋白裂解液是一種在非變性條件下裂解細胞和組織的裂解液。能裂解細胞并在非變性條件下釋放胞漿蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。非變性條件下的裂解蛋白產物*大限度地保留了蛋白的特性和功能。本裂解液裂解的細胞和組織樣本，可以用于PAGE，Western，**沉淀和**共沉淀等。
 
產品組成：
產品組成
310013
310014
非變性裂解液
50 ml
100 ml
蛋白酶抑制劑混合物
100ul
200ul
 
使用方法：
A． 細胞裂解
1.       裂解液制備：每1ml冷的非變性裂解液中加入2ul蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。
2.       取5-10×106個細胞，在4℃，1000rpm條件下離心5-10分鐘，小心吸取培養基，盡可能吸干，收集細胞。
3.       用冷PBS洗滌細胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。
4.       每5×106個細胞中加入500ul冷的裂解液（每106個細胞加100ul 非變性裂解液。大約相當于6孔板的每孔加入100ul~150ul，或一個75 cm2培養瓶加1~2 ml。裂解液和細胞應充分接觸。如果非變性裂解液不足量，細胞裂解效率將會降低），混勻后，在4℃條件下振蕩15-20分鐘。
5.       在4℃，14000rpm條件下離心15分鐘。
6.       快速將上清吸入另一預冷的干凈離心管，用于下游實驗。
 
B． 組織裂解
1.       裂解液制備：每1ml冷的非變性裂解液加入2ul蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。
2.       取100mg組織樣本剪碎，加入1ml裂解液，用組織勻漿器勻漿至無明顯肉眼可見固體。
3.       將組織勻漿吸入另一預冷的干凈離心管中，在4℃，10000rpm條件下離心5分鐘。
4.       將上清吸入另一預冷的干凈離心管，用于下游實驗。
 
上述蛋白提取物可分裝后于-80℃冰箱保存備用。
 
 
注意事項：
1.     實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。
2.     整個過程須保持樣品處于低溫狀態。
 
儲存條件：
-20℃保存。
 

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