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抗体纯化试剂盒使用说明书
抗体纯化试剂盒使用说明书

抗体小量纯化试剂盒
产品货号ZKCY-18110
Protein A 对不同来源IgG 结合剂量
高亲和性（如兔） 低亲和性（如小鼠）
Protein A Sepharose 4 FF结合剂量35 mg/ml 3-10 mg/ml
Protein A Sepharose 4 FF每次用量40微升40微升（50%悬液）
每次纯化抗体数量700 微克60-200微克
【操作步骤】
1. 将抗血清低温15000g离心5分钟,*上层有漂浮物,*下层有沉淀,取中间层。
优化步骤:将离心后抗血清用0.22 μm针头滤器过滤,可去除漂浮的脂肪和沉淀颗粒。
2. 振荡悬匀Protein A Sepharose 4 FF。
3. 加40μl （50%）Protein A Sepharose 4 FF悬液到小离心柱。应去掉Tip的**。
4. 加600 μl Buffer A.到小离心柱，500g离心1分钟。
5. 用Buffer A.1:1稀释样品。将稀释的样品加入小离心柱，加盖，翻转混匀Protein
A Sepharose与样品，重复翻转5分钟，以使Protein A Sepharose与样品充分结合，
100-150g离心1分钟。
注： 为避免液体从离心柱底部流出, 混匀时加盖并以盖为下方.
6. 加600 μl Buffer A 到小离心柱，500g离心1分钟。再加600 μl Buffer A 到小
离心柱，500g离心2分钟。
7. 洗脱选择：
对于mouse IgG1, rat IgG1, rat IgG2a, rat IgG2b and bovine IgG1(或者不
确定的抗体亚型，使用下面(1)-(2)步洗脱.
对于mouse IgG2a, mouse IgG2b, mouse IgG3, rat IgG2c, humanIgG1-IgG4,
rabbit IgG, guinea pig IgG1, guinea pig IgG2, bovine IgG2 and anyother IgGs,
使用下面(2)步洗脱.
(1) 加0.1 mL Buffer B1 入柱子，并且柱子下面的接收管内加入5 uL
Buffer C . 500g离心5分钟.
(2) 加0.1 mL Buffer B2 入柱子，并且柱子下面的接收管内加入13 uL
Buffer C . 500g离心5分钟.
8. 柱子的更新，可安英文说明处理[完]
小鼠兔抗血清羊
IgG浓度10 mg/ml 5 mg/ml 20 mg/ml

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