1. 抗**药敏纸片分类和名称
类 别
中文名称
英文名称
缩 写
剂 量
多烯类
两性霉素 B
Amphotericin B
AMB
10 ug
制霉菌素
Nystatinum
NYS
50 ug
吡 咯 类
咪唑类
咪康唑/达克宁
Miconazole
MIC
益康唑
Enconazole
ECO
酮康唑
Ketoconazole
KET
15 ug
克霉唑
Clotrimazole
CLO
三唑类
氟康唑
Fluconazole
FLU
伊曲康唑
Itraconazole
ITC
8 ug
其 他
5-氟胞嘧啶
5-Flurocytosine
FC
1 ug
抗**药敏专用NCCLS推荐的RPMI-1640平板
9 cm
注:纸片直径9.2 mm,30片/支,-20℃-8℃保存,效期见包装。
2. 接种液的配制和接种
接种液的配制中,菌液浓度的控制是重要的,过浓会导致吡咯类抑菌圈判定困难出现假阴性。
对于大多数菌株,菌液浓度调成0.5麦氏浊度即可;克柔***应再稀释5倍;隐球菌属调成1.0麦氏浊度。
用无菌棉拭子沾取菌悬液,略挤压,直接均匀涂布平板,*后沿平皿周边绕两圈,保证涂布均匀。然后,平皿放35℃开盖倒扣干燥15分钟,须待平板上的水分被琼脂完全吸收后再贴纸片。纸片贴上后用镊尖压一下,使其贴平。建议9cm平皿一般贴直径9.2cm的药敏纸片4-5个。
3. 培养
在多数情况下,30-35℃培养18-24小时后马上测量抑菌圈,时间过长会使抑菌圈变小而导致假耐药。如果生长不好,抑菌圈不清(如:新型隐球菌)可适当延长培养时间至抑菌圈清晰为止。
4. 判读标准
敏 感 ( S )
中 介 ( I )
耐 药 ( R )
两性霉素B (10 ug)
≥15 mm
10-14 mm
< 10 mm
制霉菌素 (50 ug)
咪康唑/达克宁 (10 ug)
≥20 mm
12-19 mm
≤11 mm
益康唑 (10 ug)
酮康唑 (15 ug)
克霉唑 (10 ug)
氟康唑 (15 ug)
伊曲康唑 (8 ug)
5-氟胞嘧啶 (1 ug)
注:
l 对于多烯类抗**药(AMB和NYS),测量生长清晰的抑菌圈,抑菌圈内出现的菌落必须视为耐药突变株。
l 对于吡咯类抗**药(FLU、ITC、MIC、ECO、KET、CLO),在抑菌圈内可能会出现较小的部分被抑制的菌落。测量时以正常生长的菌落形成的抑菌圈为准,其内部的较小菌落不应视为突变株。
l 对于5-氟胞嘧啶(FC),测量生长清晰的抑菌圈,抑菌圈内出现的菌落通常为耐药突变株。
l 抗**药敏平板必须使用NCCLS推荐的RPMI-1640平板。使用其它平板可能会使FC无抑菌圈或抑菌圈减小。其它抗**药敏的抑菌圈也有不同程度的改变。