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SDS-PAGE凝胶制备试剂盒

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产品名称: SDS-PAGE凝胶制备试剂盒
产品型号: PW0202
产品展商: 美国Biomiga
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简单介绍

SDS-PAGE凝胶制备试剂盒由美国Biomiga公司研发生产,是世界上*优良的分子生物学产品之一,上海欧韦达生物是Biomiga的代理商。


SDS-PAGE凝胶制备试剂盒  的详细介绍
SDS-PAGE凝胶制备试剂盒由美国Biomiga公司研发生产,是世界上*优良的分子生物学产品之一,上海欧韦达生物是Biomiga的代理商。

说明 :

产品简介
Biomiga SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂,用户只需制备制胶器具和蒸馏水,即可配制高质量的PAGE胶了。SDS-PAGE凝胶配制试剂盒不仅可用于配制SDS-PAGE凝胶,也可用于配制非变性(native)PAGE凝胶。本试剂盒约可配制常规大小、不同聚合度的PAGE胶(即聚丙烯酰胺凝胶)30-50块。
 
组分与保存条件

组分
数量
保存
Acr-Bis(30%)
100 mL
4oC避光
分离胶缓冲液(A)
100 mL
RT
浓缩胶缓冲液(B)
30 mL
RT
SDS (10%)
10 mL
RT
APS(过硫酸铵)
0.5 g
RT
TEMED
0.5 mL
4oC避光

注:APS(过硫酸铵)配制成10%溶液后,应分装置-20°C保存,通常半年内有效。
 
使用方法
1. 取去离子水加入APS管中至终体积为5ml,0.5ml分装,置-20℃保存备用。
2. 根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶)。配制完分离胶后,可加双蒸水密封,等待其凝固。
 
SDS-PAGE分离胶的浓度与*佳分离范围

SDS-PAGE分离胶浓度
*佳分离范围
6%
50-150 KDa
8%
30-90 KDa
10%
20-80 KDa
12%
12-60 KDa
15%
10-40 KDa

分离胶的配比(以10 mL为例)

成分/胶浓度
6%
8%
10%
12%
15%
蒸馏水
5.5
5.1
4.2
3.5
2.5
Acr-Bis(30%)
2.0
2.5
3.3
4. 0
5.0
分离胶缓冲液(A)
2.5
2.5
2.5
2.5
2.5
SDS (10%)
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
APS(10%)
0.1
0.008
0.1
0.1
0.1
TEMED
0.015
 
0.006
0.006
0.006

3.待分离胶充分凝固后,弃去水,然后按照如下表格配制SDS-PAGE的浓缩胶(也称上层胶、积层胶或堆积胶)配制不同体积的浓缩胶。
 

成分/胶浓度
2 mL
3 mL
4 mL
蒸馏水
1.4
2.1
2.7
Acr-Bis(30%)
0.33
0.5
0.67
浓缩胶缓冲液(B)
0.25
0.38
0.5
SDS (10%)
0.02
0.03
0.04
APS(10%)
0.02
0.03
0.04
TEMED
0.005
0.007
0.013

 
4. 配制好浓缩胶后,插入与凝胶厚度相匹配的梳子,待其充分凝固好后拔出梳子即可使用。
 
注意事项
1. APS的水溶液不稳定,应置-20℃保存。每次取用后应立即放回冰箱,尽量减少室温存放时间,以防失效。如发现凝胶聚合不好,应考虑丢弃使用过的APS,更换新配制的APS。
2. 另外PAGE凝聚的速度和温度及催化剂的用量关系密切,在其它条件不变的情况下,可通过改变TEMED的用量,控制PAGE凝胶的聚合速度,凝胶聚合过快不利于操作。
3. 操作中,特别是液体的混匀应尽量避免气泡的产生。
4. 未聚合的丙烯酰胺有毒,为了您的**和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


Biomiga位于美国圣地亚哥,是一家集研发、生产及销售为一体的高科技企业,其研发产品处于世界**水平,产品质量可媲美全球一线品牌;我们服务于全球的生物制药、农业生物产业、学术研究等机构,致力于为客户提供*上等的产品和技术服务! 主要研发和生产生物科研实验室使用的各种纯化试剂盒,如核酸纯化、病毒纯化;同时为客户提供质粒生产、基因克隆、siRNA 构建、病毒构建包装、荧光定量PCR、蛋白质表达和基因文库构建等服务。
 
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