几分钟的工作,就可得到更好的PAGE条带,使电泳结果锦上添花。可以高效去除蛋白质溶液中的盐酸胍、硫酸铵及酸性缓冲液等与常规PAGE电极缓冲液不相容的杂质,同时,有效浓缩蛋白质,在不到10分钟内处理完就可以直接上样电泳。比常规透析法、超滤法更高效,简单、快速。
原理:
EP离心管中,在DMSO存在下,蛋白质与修饰过的硅藻土胶结合,20μl的胶可以与20μg以上的蛋白质结合,原蛋白质缓冲液被离心洗去,再用50μl洗涤/上样缓冲液洗出蛋白,即可得到净化富集的蛋白质。
特点:
1、 无需透析即可高效去除染料、还原剂,去污剂、糖、甘油、尿素、硫酸铵和胍等与PAGE电泳不相容的杂质
2、处理小至2-350ul样品
3、75-85%的蛋白质回收率
4、10分钟内完成,可直接上样电泳
5、样品浓缩10倍, 20μl的胶可以与70μg以上的蛋白质结合,比常规透析法、超滤法高效,简单、快速
适用的蛋白质样品:
1、 溶解在盐酸胍中的包涵体蛋白
2、含酸性缓冲液、硫氰酸盐或尿素等成分的蛋白质
3、 硫酸铵沉淀的蛋白质
4、 稀释的蛋白质溶液
几种准备样品方法的比较:
项目
PAGEprep® Kit
透析
超滤
样品体积
200μl
蛋白质回收率
70-85%
70-90%
所需时间
<10m
20m-10h
30-120m
是否浓缩
是
否