M-MLV逆转录酶

Moloney Murine Leukemia Virus Reverse Transcriptase(MMLV
RT，M-MLV逆转录酶)是一种RNA依赖的DNA聚合酶，可用于
长mRNA (>5kb) 为模板的cDNA合成。该酶是M-MLV 的pol基因产物，
由一个分子量为71kDa的亚单位组成。M-MLV RT的RNase H活性比
常用的鸟类成髓细胞性白血病病毒（Avian Myeloblastosis Virus，
AMV) 逆转录酶弱。

特点
  •  提供5×反应缓冲液：250mM Tris-HCl (pH 8.3，25℃)，375mM  
   KCl，15mM MgCl2，50mM DTT。
  •  高温失活：在70℃加热M-MLV RT 10分钟灭活。
 
用途
  •  cDNA第一链合成。
  •  引物延伸。

操作手册   Promega Product Information    9PIM170

储存条件：储存于-20℃。

储存缓冲液：20mM Tris-HCl (pH 7.5，25℃)，0.2M NaCl，0.1mM
EDTA，1mM DTT，0.01% Nonidet® P-40和50%甘油。

单位定义：一个单位定义为：在37℃，10分钟内催化1nmol脱氧核
苷酸掺入到酸沉淀物中所需的酶量。反应条件为：50mM Tris-HCl
(pH 8.3,25℃)，7mM MgCl2，40mM KCl，10mM DTT，0.1mg/ml
BSA，0.5mM [3H]dTTP，0.025mM oligo(dT)50，0.25mM poly(A)400
和0.01% NP-40。

质量控制测试：活性，SDS-PAGE/纯度，DNase，RNase，核酸内
切酶，cDNA第一链合成。

来源：重组E. coli菌株(1)。

技术资料    Promega Notes PN071, PN075