肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor,TNF)是一种具有多种生物活性的细胞因子。人TNF-α基因编码前体蛋白,其信号肽将前体蛋白固定在细胞膜上,成为具有活性的跨膜干扰素(TNF),分子质量为26×103,经酶切去除信号肽生成分泌型TNF-α,分子质量为17×103。TNF-α细胞来源广泛,包括各种**细胞、内皮细胞、成纤维细胞、表皮细胞、角质细胞、平滑肌细胞、星形细胞、成骨细胞等。
TNF-α具有广泛的生物学活性,如:参与炎性反应和**应答,抗肿瘤,参与内**性休克等病理过程,引起恶病质等。其具有双重作用,,一方面在机体**调节,机体生理功能和抗感染等方面发挥重要作用,另一方面若持续释放或产生过多则会引起发热!、休克、恶病质等,同时TNF-α可进一步诱导IL-6、IL-8、IL-10等细胞因子的产生,这些促炎性细胞因子参与体内急性反应、发热反应、引起趋化肽释放等,还可使内皮细胞活化而导致血管通透性增加。
本实验采用双抗体夹心法。抗人TNF-α单抗包被于酶标板上,标本和标准品中的TNF-α会与单抗结合,游离的成分被洗去。加入生物素化的抗人TNF-α抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合;抗人TNF-α抗体与结合在单抗上的人TNF-α结合而形成**复合物,游离的成分被洗去加入显色剂,若反应孔中有TNF-α,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂显蓝色,加终止液变黄。在450 nm处测OD值,TNF-α浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中人TNF-α浓度。
本试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆、细胞培养上清液或组织匀浆上清液中人TNF-α浓度,供科研使用。
试剂盒内容物:
产品名称
规格
1a标准品
2支(冻干)
1b标准品稀释液
1瓶
2a浓缩生物素化抗体
1支
2b生物素化抗体稀释液
3a浓缩酶结合物
3b酶结合物稀释液
4浓缩洗涤液20×
显色液
终止液
抗体包被板条
8*12
封板胶纸
3张
说明书
1份
保存条件:
4℃保存,6个月有效。
注意事项:
1. 短期内使用可将试剂盒保存在2-8℃,如长时间请于-20℃保存。
2. 浓缩生物素化抗体(2a),浓缩酶结合物(3a)装量极少,运输中可能会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请用手甩几下或离心处理,以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。
3. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,加热使结晶完全溶解后再使用。
4. 不建议重复使用标准品。
5. 充分混匀对反应结果尤其重要,*好使用微量振荡器,也可在反应过程中手工混匀。
6. 在试验中标准品和样本检测时建议作双复孔或三复孔。
7. 为了您的**和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。